利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。被检测的DNA碱基顺序依次读出800bp以上，sanger测序是一代所有测序和新一代所有测序的金标准。
sanger测序即目前所有基因检测的国际金标准，是包括荧光定量PCRTaqman探针法、普通PCR法、芯片法、二代测序法、质谱法等方法的金标准。